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比普通DIG随机引物法标记效率高, 操作简单, 可用于Southern、Northern和斑点杂交以及菌落和噬菌体筛选。一个Kit可用于12次标记反应和24次检测反应。组成: 5×DIG-高效标记试剂; 未标记对照DNA, PBR328; DNA稀释液; 抗-DIG-碱性磷酸酶复合物; NBT/BCIP储存液; 10×封闭液; DIG定量复试纸条; DIG对照试纸条, -20℃保存。
Roche地高辛标记试剂盒选择指南
地高辛标记常用的方法如下：
DNA – PCR labeling，random primed labeling，Nick Translation
RNA- in vitro transcription
寡核苷酸- 3 End Labeling，3 Tailing
不同的标记方法各有差异，客户可根据起始模板浓度、模板是否需要纯化、探针检测浓度、探针应用等几个因素综合考虑，选择*的标记试剂盒，详见表1。
表1 Roche地高辛标记试剂盒选择指南
标记方法（试剂盒名称） | 方法优点 | 起始模板量 | 可检测的标记探针 | 探针应用 | 方法评论 |
PCR labeling PCR DIG探针合成试剂盒 Cat#：11636090910 | ☆仅需少量的模板 ☆甚至可用不纯的模板 ☆相比于其他方法，需更少的优化步骤； ☆标记探针具高产量 ☆推荐用于非常短的探针（＜100 bp） ☆产生高灵敏度探针 | ☆质粒DNA，10- 100 pg（理想下用10 pg） ☆基因组DNA，1- 50 ng（理想状况下用10 ng） | 0.10-0.03 pg DNA | ☆基因组southern ☆northern ☆也可用于dot/slot、文库筛选和原位杂交 | ☆开始标记反应前在无 DIG-dUTP的情况下，优化PCR ☆模板浓度对产生灵敏度探针 非常 重要 ☆使用更少的DIG标记长探针 （＞1 kb） ☆勿用PCR DIG标记混合物 （DIG-dUTP:dTTP=1:20）替换试剂盒 内的标记混合（DIG-dUTP:dTTP=1:3） |
Random primed labeling，high efficiency DIG-high prime DNA标记与检测起始试剂盒I Cat#: 11745832910 DIG-high prime DNA标记与检测起始试剂盒II Cat#: 11585614910 | ☆产生非常敏感的探针 ☆反应可扩大十倍 | ☆ 300ng DNA（针对可检测单拷贝基因的探针） ☆若标记反应反应guoye，模板量可更低 | 0.10-0.03 pg DNA | ☆基因组southern blots ☆文库筛选 ☆也可用于dot/slot blots、northern blots | ☆需要高纯度的模板 ☆非常敏感于不纯的模板 ☆用水或Tris buffer重悬模板。 勿用TE，因EDTA会一直标记反应 |
Nick Translation | ☆允许控制探针长度（原位杂交实验非常重要） | ☆ 1 μg DNA | 主要用于原位杂交；灵敏度因检测方法而异； | ☆原位杂交 | ☆需要高纯度的模板 ☆标记前模板不要变性 |
RNA labeling DIG Northern 起始试剂盒Cat#：12039672910 | ☆产生大量标记 ☆标记探针*不含载体序列 ☆RNA探针是单链 ☆RNA探针用于northen印迹灵敏度比DNA探针高 ☆原位杂交实验中DIG-标记的RNA探针可轻易片段化 | ☆质粒DNA，线性化：1 μg ☆带启动子PCR 产物：100-200 ng | 0.10–0.03 pg DNA 0.10–0.03 pg RNA | ☆Northern ☆原位杂交 ☆文库筛选 ☆Dot/slot | ☆需要高纯度模板 |
3 End Labeling DIG 寡核苷酸3末端标记试剂盒，第二代 Cat#： | ☆仅需要少量的模板 ☆反应可无限扩大 | ☆100 pmol寡核苷酸 | 10 pg DNA | ☆文库筛选 ☆Dot/slot bl ☆原位杂交 | ☆寡核苷酸应用HPLC或Elutips（Schleicherand Schuell）纯化 ☆探针不用纯化即可用于下游实验 |
3 Tailing DIG管核苷酸尾标记试剂盒，第二代 Cat#： | ☆仅需少量模板 ☆相比于末端标记法产生更灵敏的探针 ☆反应可无限扩大 | ☆100 pmol寡核苷酸 | 1 pg DNA | ☆文库筛选 ☆Dot/slot ☆原位杂交 | ☆寡核苷酸应用HPLC或Elutips（Schleicherand Schuell）纯化 ☆探针不用纯化即可用于下游实验 |
| 罗氏地高辛(Roche)试剂 | |||
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| 11745832910 | DIG高效DNA标记及检测Starter Kit 1 | Kit：1 kit | ￥4,719 |
| 11585614910 | DIG高效DNA标记及检测Starter Kit II | Kit：1 kit | ￥4,719 |
| 11093657910 | DIG(地高辛)DNA标记及检测试剂盒 | Kit：1 kit | ￥7,447 |
| 11175033910 | DIG DNA 标记试剂盒 | Kit(40个标记反应)：( | ￥6,545 |
| 11363514910 | DIG发光检测试剂盒(可做50张10×10cm膜检测反应) | Kit：(50 blots) | ￥4,796 |
| 11175041910 | DIG核酸检测试剂盒 | 1 kit (40 blots) | ￥4,312 |
| 11480863001 | DIG寡核苷酸5′末端标记试剂盒 | Set (10个标记反应) | ￥5,841 |
| 11636090910 | PCR DIG 探针合成试剂盒 | Kit(25个标记反应) | ￥4,884 |
| 11175025910 | DIG RNA标记试剂盒 | Kit：(2 x 10 labeling reactions) | ￥6,468 |
| 11585606910 | DIG 高效标记试剂 | 160μ1(40个标记反应) | ￥6,743 |
| 11093274910 | 抗地高辛(DIG)碱性磷酸酶复合物 | 150u(200ul) | ￥2,156 |
| 11655884001 | CSPD化学发光底物 | 1ml | ￥2,695 |
| 11685627001 | CDP-Star化学发光底物CDP-Star | 1ml | ￥2,398 |
| 11277065910 | DIG DNA标记混合物 | 50ul(25个反应) | ￥1,749 |
| 11603558001 | DIG 简便杂交液 | 500ml | ￥1,771 |
| 11585762001 | DIG 清洗及阻断缓冲液组合 | 1set(30 blots) | ￥2,299 |
| 11096176001 | 阻断试剂 | 50g | ￥1,089 |
| 11209256910 | DIG标记的UTP | 250nmol(25μl) | ￥2,453 |
| 11093088910 | DIG标记的dUTP | 25nmol(25μl) | ￥2,827 |
| 11363905910 | DIG标记的ddUTP | 25nmol(25μl) | ￥1,925 |
| 11209272001 | 尼龙杂交转印膜，带正电荷 | 10 sheets | ￥Roche |
| 12039672910 | DIG高效RNA标记及检测试剂盒 | 1 kit | ￥4,301 |
| 11277073910 | DIG高效标记RNA混合物 | 40 μl (20 reactions) | ￥1,551 |
| 3353575910 | DIG 3*末端寡核苷酸标记试剂盒 | 1 kit | ￥6,325 |
| 3353583910 | DIG Oligonucleotide Tailing Kit, 2nd generation | 1 kit (25 tailing reactions) | ￥5,335 |