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小鼠髓过氧化物酶ELISA试剂盒规格

更新时间:2015-08-31 点击次数:1542
      小鼠髓过氧化物酶ELISA试剂盒规格
    Elisa试剂盒规则:
   1、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
   2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
   3、温浴时,ELISA试剂盒要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
   4、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温6作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
   5、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*。ELISA试剂盒没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
     在Elisa试剂盒规格中,进行各项实验条件的选择是很重要的,包括:
     1.固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。ELISA试剂盒其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,ELISA试剂盒在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
     2.包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。ELISA试剂盒吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,ELISA试剂盒在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA试剂盒进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
    3.酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。ELISA试剂盒供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。ELISA试剂盒底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是双氧水在临用前加入。

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