产品简介：
? 萤 火虫萤 火虫光素 酶报告基因检测试剂盒 酶报告基因检测试剂盒 (Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit)，是 一种 以萤光素 (luciferin)为 底物来检测萤火虫 萤光素 酶(firefly luciferase)活性的试剂盒 。
? 萤 火虫光素酶 是一种分子量约为 是一种分子量约为 是一种分子量约为 是一种分子量约为 是一种分子量约为 是一种分子量约为 是一种分子量约为 是一种分子量约为 61kD的蛋白，在 ATP、镁离子和氧气存在的条件下， 可以催化 luciferin氧化成 oxyluciferin。在luciferin氧化的过程中，会发出生物 萤光(bioluminescence)。生物萤光 可以 通过 化学发光仪 (luminometer)或 液闪测定仪 进行 测定。 测定。 本试剂盒的检测原理参考图 本试剂盒的检测原理参考图 本试剂盒的检测原理参考图 1。
图1. 萤火虫光素酶的检测原理图。 萤火虫光素酶的检测原理图。 萤火虫光素酶的检测原理图。
? 通过 萤光素 和萤光素 酶这一生物发光体系，可以 酶这一生物发光体系，可以 酶这一生物发光体系，可以 酶这一生物发光体系，可以 酶这一生物发光体系，可以 酶这一生物发光体系，可以 酶这一生物发光体系，可以 酶这一生物发光体系，可以 酶这一生物发光体系，可以 酶这一生物发光体系，可以 非常 灵敏、地检测基因 的表达。通常把感兴趣灵敏、地检测基因 的表达。通常把感兴趣灵敏、地检测基因 的表达。通常把感兴趣灵敏、地检测基因 的表达。通常把感兴趣灵敏、地检测基因 的表达。通常把感兴趣灵敏、地检测基因 的表达。通常把感兴趣灵敏、地检测基因 的表达。通常把感兴趣灵敏、地检测基因 的表达。通常把感兴趣灵敏、地检测基因 的表达。通常把感兴趣灵敏、地检测基因 的表达。通常把感兴趣灵敏、地检测基因 的表达。通常把感兴趣灵敏、地检测基因 的表达。通常把感兴趣灵敏、地检测基因 的表达。通常把感兴趣灵敏、地检测基因 的表达。通常把感兴趣灵敏、地检测基因 的表达。通常把感兴趣灵敏、地检测基因 的表达。通常把感兴趣灵敏、地检测基因 的表达。通常把感兴趣灵敏、地检测基因 的表达。通常把感兴趣的转录调控元件 转录调控元件 转录调控元件 转录调控元件 转录调控元件 或 5’启动子区 启动子区 启动子区 启动子区 克隆在 克隆在 克隆在 luciferase的上游， 的上游， 的上游， 的上游， 或把 3’-UTR区克隆在 区克隆在 区克隆在 区克隆在 luciferase的下游等， 的下游等， 的下游等， 的下游等， 的下游等， 构建成报告基因 构建成报告基因 构建成报告基因 构建成报告基因 构建成报告基因 构建成报告基因 构建成报告基因 (reporter gene)质粒。然后转 质粒。然后转 质粒。然后转 质粒。然后转 质粒。然后转 质粒。然后转 染细胞， 用适当 药物等 处理 细胞 后裂解细胞，测定 后裂解细胞，测定 后裂解细胞，测定 后裂解细胞，测定 后裂解细胞，测定 后裂解细胞，测定 后裂解细胞，测定 萤光素 酶活性。通过 萤光素酶活性的高低 光素酶活性的高低 光素酶活性的高低 光素酶活性的高低 光素酶活性的高低 光素酶活性的高低 光素酶活性的高低 来判断 药物处理等对目的基因 药物处理等对目的基因 药物处理等对目的基因 药物处理等对目的基因 药物处理等对目的基因 药物处理等对目的基因 药物处理等对目的基因 药物处理等对目的基因 药物处理等对目的基因 的转录调控作用 。
? 萤火虫 萤光素酶催化 光素酶催化 luciferin发光的zui强波长为 发光的zui强波长为 560nm (centered around 560nm)。
? 本试剂盒可以测定 100个样品。 个样品。
包装清单： 产品编号 产品名称 包装
005-1
报告基因细胞裂解液 报告基因细胞裂解液 报告基因细胞裂解液
60ml
RG005-2 萤火虫 萤光素酶检测试剂 光素酶检测试剂 光素酶检测试剂 10ml
—
说明书
1份
保存条件：
报告基因细胞裂解液 报告基因细胞裂解液 4ºC保存 3个月有效， -20ºC保存 一年有效； 一年有效； 萤光素酶检测试剂 光素酶检测试剂 -20ºC避光保存 6个月有效， -80ºC避光保存 一年 有效。
注意事项：
? 为取得*测定效果，在用单管的 为取得*测定效果，在用单管的 为取得*测定效果，在用单管的 为取得*测定效果，在用单管的 为取得*测定效果，在用单管的 为取得*测定效果，在用单管的 为取得*测定效果，在用单管的 为取得*测定效果，在用单管的 为取得*测定效果，在用单管的 为取得*测定效果，在用单管的 为取得*测定效果，在用单管的 为取得*测定效果，在用单管的 为取得*测定效果，在用单管的 化学发光 仪测定 时，样品和试剂混合后到仪测定 时，样品和试剂混合后到仪测定 时，样品和试剂混合后到仪测定 时，样品和试剂混合后到仪测定 时，样品和试剂混合后到仪测定 时，样品和试剂混合后到仪测定 时，样品和试剂混合后到仪测定 时，样品和试剂混合后到仪测定 时，样品和试剂混合后到仪测定 时，样品和试剂混合后到仪测定 时，样品和试剂混合后到仪测定 时，样品和试剂混合后到仪测定 时，样品和试剂混合后到仪测定 时，样品和试剂混合后到仪测定 时，样品和试剂混合后到前的时间 应尽量控制在相同 尽量控制在相同 尽量控制在相同 尽量控制在相同 尽量控制在相同 时间内， 例如 30秒内 ；使用具有化学发光测定功能的 ；使用具有化学发光测定功能的 ；使用具有化学发光测定功能的 ；使用具有化学发光测定功能的 ；使用具有化学发光测定功能的 ；使用具有化学发光测定功能的 ；使用具有化学发光测定功能的 ；使用具有化学发光测定功能的 ；使用具有化学发光测定功能的 ；使用具有化学发光测定功能的 ；使用具有化学发光测定功能的 ；使用具有化学发光测定功能的 ；使用具有化学发光测定功能的 多功能 多功能 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好然后统一入萤火虫素检 测试剂 。
? 由于温度对酶反应 有影响，所以测定时 有影响，所以测定时 样品和 试剂 均需达到室温 需达到室温 后再进行 测定。
? 为保证 萤光素酶检测试剂的稳定性，可以采取 光素酶检测试剂的稳定性，可以采取 光素酶检测试剂的稳定性，可以采取 光素酶检测试剂的稳定性，可以采取 光素酶检测试剂的稳定性，可以采取 光素酶检测试剂的稳定性，可以采取 光素酶检测试剂的稳定性，可以采取 光素酶检测试剂的稳定性，可以采取 光素酶检测试剂的稳定性，可以采取 光素酶检测试剂的稳定性，可以采取 光素酶检测试剂的稳定性，可以采取 光素酶检测试剂的稳定性，可以采取 光素酶检测试剂的稳定性，可以采取 光素酶检测试剂的稳定性，可以采取 光素酶检测试剂的稳定性，可以采取 光素酶检测试剂的稳定性，可以采取 适当 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 分装后避光保存的方法，以免反复冻融和长时间暴露 于室温。 室温。 室温。 经测 试，反复 冻融三次，对测定结果无明显影响。 冻融三次，对测定结果无明显影响。 冻融三次，对测定结果无明显影响。
? 样品和测定试剂混合后，必须等待 样品和测定试剂混合后，必须等待 样品和测定试剂混合后，必须等待 样品和测定试剂混合后，必须等待 样品和测定试剂混合后，必须等待 1-2秒， 再进行 再进行 测定。时间通常为 测定。时间通常为 测定。时间通常为 测定。时间通常为 10秒，根据情况也可以测定更长或 秒，根据情况也可以测定更长或 秒，根据情况也可以测定更长或 秒，根据情况也可以测定更长或 更短 时间，但是 同一批样品 宜使用相同的测定时间。 使用相同的测定时间。 使用相同的测定时间。
? 为避免 由于 质粒转细胞时效率的差异而带来误， 质粒转细胞时效率的差异而带来误， 质粒转细胞时效率的差异而带来误， 质粒转细胞时效率的差异而带来误， 质粒转细胞时效率的差异而带来误， 质粒转细胞时效率的差异而带来误， 质粒转细胞时效率的差异而带来误， 质粒转细胞时效率的差异而带来误， 质粒转细胞时效率的差异而带来误， 质粒转细胞时效率的差异而带来误， 质粒转细胞时效率的差异而带来误， 质粒转细胞时效率的差异而带来误， 质粒转细胞时效率的差异而带来误， 质粒转细胞时效率的差异而带来误， 质粒转细胞时效率的差异而带来误， 质粒转细胞时效率的差异而带来误， 质粒转细胞时效率的差异而带来误， 质粒转细胞时效率的差异而带来误， 可以同时转入 可以同时转入 可以同时转入 可以同时转入 可以同时转入 可以同时转入 海肾 萤光素酶 (Renilla luciferase)的报告基因质 粒 参，采用碧云天的双 萤光素酶报告基因检测试剂盒 光素酶报告基因检测试剂盒 光素酶报告基因检测试剂盒 光素酶报告基因检测试剂盒 光素酶报告基因检测试剂盒 (RG027/RG028)进行检测；也 进行检测；也 可以同时转入 可以同时转入 可以同时转入 β-半乳糖 苷酶(β-galactosidase, β-gal)报告基因质粒作为内参 报告基因质粒作为内参 报告基因质粒作为内参 报告基因质粒作为内参 采用碧云天生产的 β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒 半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒 半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒 半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒 半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒 半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒 半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒 (RG0036)进行检测。 进行检测。 采用 本试剂盒 中的报告基因细胞裂解液获得样品可以直接用于 中的报告基因细胞裂解液获得样品可以直接用于 中的报告基因细胞裂解液获得样品可以直接用于 中的报告基因细胞裂解液获得样品可以直接用于 β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒 半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒 半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒 (RG0036)的检测 。
? 本产品于专业人员的 限于专业人员的 科学研究用 科学研究用 ，不得用于临床诊断或治疗，食品药存放普通住宅内。 不得用于临床诊断或治疗，食品药存放普通住宅内。 不得用于临床诊断或治疗，食品药存放普通住宅内。 不得用于临床诊断或治疗，食品药存放普通住宅内。 不得用于临床诊断或治疗，食品药存放普通住宅内。 不得用于临床诊断或治疗，食品药存放普通住宅内。 不得用于临床诊断或治疗，食品药存放普通住宅内。
? 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1. 裂解细胞： 将报告基因细胞裂解液 报告基因细胞裂解液 报告基因细胞裂解液 充分混匀 后，按如下方式加入报告基因细胞裂解液，充分。 按如下方式加入报告基因细胞裂解液，充分。 按如下方式加入报告基因细胞裂解液，充分。 按如下方式加入报告基因细胞裂解液，充分。 按如下方式加入报告基因细胞裂解液，充分。
a. 对于贴壁细胞 对于贴壁细胞 对于贴壁细胞 对于贴壁细胞 对于贴壁细胞 对于贴壁细胞 ：吸尽细胞培养液后 细胞培养液后 细胞培养液后 细胞培养液后 细胞培养液后 细胞培养液后 ，参考下表 ，参考下表 ，参考下表 ，参考下表 ，参考下表 加入 适量的 报告基因细胞 报告基因细胞 报告基因细胞 报告基因细胞 报告基因细胞 报告基因细胞 裂解液； 裂解液； 裂解液； 裂解液； 对于悬浮细胞 对于悬浮细胞 对于悬浮细胞 对于悬浮细胞 对于悬浮细胞 对于悬浮细胞 ：离心去上清后 离心去上清后 离心去上清后 离心去上清后 离心去上清后 离心去上清后 ，参考 下表 加入 适量 报告基因细胞 报告基因细胞 裂解液。