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猪ELISA试剂盒操作注意事项

更新时间:2021-07-27 点击次数:948
  猪ELISA试剂盒具有敏感性高,特异性强,快速等特点,目前广泛应用于农兽药、真菌残留检测,该方法从加样、洗板、显色到读数步骤繁多,其中任何一步控制不好都可能影响检测结果的准确性。因此,在实际测定操作中要注意以下几点。
  1.试剂盒回温
  ELISA检测试剂盒为冷藏(2℃-8℃)保存。从冰箱拿出来后,先不要急于打开试剂盒,要等试剂盒的温度平衡至室温且试剂盒盒表面无冷凝水,检测所用的试剂需充分混匀且*溶解后再用,提前1~2小时取出试剂盒,放在室温中;或在预设25℃恒温培养箱中平衡30分钟~60分钟。
  2.环境温度的控制
  1)实验室应配备温湿度表,且确保定期计量。
  2)根据天气情况设定实验室空调制冷或加温功能,待室温稳定且无干扰的条件下再开始检测流程。
  3)选用带温控装置的孵育仪器,如恒温孵育器、恒温培养箱、多功能酶标仪等。注意要提前开启预热。
  猪ELISA试剂盒的操作方法:
  1.包被:在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。
  2.加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,然后洗涤。
  3.加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体0.1ml。
  4.加底物液显色:于各反应孔中加入底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
  5.终止反应:于各反应孔中加入酸0.05ml。
  6.结果判定:猪ELISA试剂盒可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或较浅,依据所呈颜色的深浅。

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